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土壤基因組DNA提取試劑盒

英文名稱:
分子式:
分子量:
別名:
產(chǎn)品訂購:
品名 規(guī)格 包裝 單價 貨期
土壤基因組DNA提取試劑盒 50T 詢價 現(xiàn)貨
土壤基因組DNA提取試劑盒 100T 詢價 現(xiàn)貨
性狀:
試劑盒內(nèi)容: 50T      100T
溶液A        25ml     50ml
溶液B         3ml      6ml
溶液C        5ml       10ml
溶液D         10ml      20ml
漂洗液        15ml      15ml×2
洗脫液         10ml     20ml 
吸附柱         50個     100個
收集管          50個     100個
PCR增強劑       500ul    1ml
說明書           1份      1份

注:試劑盒開封后溶液A、B 、C 、D 需在2-8℃保存。PCR 增強劑-20 ℃保存。

質(zhì)量標準:
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒適合于從褐土、淤泥、火山灰等各種極端土壤環(huán)境中提取微生物 DNA。對土壤中各種細菌、真菌
有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多態(tài)性。 
本試劑盒采用我公司特有的腐殖質(zhì)吸附材料,可高效專一的去除各種腐殖質(zhì)成分而絲毫不會影響DNA的
產(chǎn)率,純度較酚、氯仿抽提法提高數(shù)倍。 
使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大、完整性好,可直接用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR 、文庫構(gòu)建、
Southern  雜交等實驗。
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機
在室溫下離心。
    1、稱取土壤樣本 0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成細粉末,加入 450ul  溶液A  震蕩混勻。 
     *  也可直接稱取樣本 0.1-0.5g 于離心管( 建議使用 2ml  圓底管) ,加入 450ul 溶液 A  劇烈震蕩混勻
1-2min 至沒有固體塊。  使用液氮研磨效果最佳。 
2 、加入50ul 溶液B  充分顛倒混勻(  不要劇烈震蕩),65℃水浴 6min,每2min充分顛倒混勻一次。 
3 、加入100ul  溶液C  充分顛倒混勻(  不要劇烈震蕩),12000rpm離心10min   。 
4 、將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管,12000rpm離心2min   。 
5 、在吸附柱中加入 200ul  溶液D  ,將離心后的上清加入到帶有溶液 D  的吸附柱中,用移液器吹吸幾次混
勻,12000rpm離心1min。
6 、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱(  必須),12000rpm離心1min。 
7 、倒掉收集管中的廢液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000rpm離心1min。 
8 、倒掉收集管中的廢液,重復步驟 7  兩次(共漂洗三次)。 
9 、倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管,12000rpm離心2min   。 
10、拿出吸附柱在室溫干燥數(shù)分鐘(  因季節(jié)及氣候等因素不等),或50℃干燥1min。 
11 、將吸附柱放入一個新的離心管中,加入 50-100ul  洗脫液(65  ℃預熱),12000rpm離心1min。 
12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中,12000rpm離心1min。離心管中即為土壤微生物 DNA 溶液。
13、若產(chǎn)物PCR 效果差,可以適當稀釋 DNA產(chǎn)物,或添加1/10 體積的PCR 增強劑。
注意事項:
1 、新鮮的土壤樣本會得到更高的產(chǎn)率,不同樣本在采樣前應先查閱相應的最佳保存條件。 
2 、若溶液中出現(xiàn)渾濁可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不會影響結(jié)果。 
3 、在需要吸取上清液的步驟中應避免吸到沉淀,否則會堵塞吸附柱,并影響產(chǎn)物純度。 
4 、洗脫緩沖液的體積最好不少于 50ul ,體積過小會影響回收效率;建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液,
用水洗脫也會損失部分產(chǎn)物;DNA應保存在-20  ℃避免反復凍融,以防降解。 
5 、若產(chǎn)物含有腐殖質(zhì)殘余則會嚴重影響 DNA的光吸收值,應采取電泳檢測和分光光度計檢測相結(jié)合的方
式鑒定。 
6 、液體試劑避免接觸皮膚,若意外接觸應立即使用大量清水沖洗。
貯存:
室溫(15℃-25 ℃)  干燥保存,復檢期 12 個月,2 ℃-8 ℃保存時間更長。
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