品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價 | 貨期 |
革蘭氏陽性菌質(zhì)粒大量提取試劑盒 | 10T | 627元 | 現(xiàn)貨 |
注意事項:
1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
2、第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在漂洗液中加入無水乙 醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。
3、使用前請先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現(xiàn)混濁,如有混濁現(xiàn)象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復(fù)澄清后再使用。
4、洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于500ul,體積過小影響回收效率;洗脫液的pH 值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH值在8.0左右( 可用NaOH 將水的pH值調(diào)至此范圍) ,pH值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20 ℃,以防DNA降解。
5、如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)?;虼笥?nbsp;10kb的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,使用400-800ml過夜培養(yǎng)物,同時按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量,吸附和洗脫時可以適當(dāng)?shù)难娱L時間,以增加提取效率。
6、DNA濃度及純度檢測:得到的質(zhì)粒DNA純度與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。得到的DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰, OD260 值為1 相當(dāng)于大約50 μg/ml 雙鏈DNA、40 μg/ml 單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9 ,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
![]() |