品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價(jià) | 貨期 |
Taq DNA 聚合酶 | 500u | 330元 | 現(xiàn)貨 |
單位定義:在74℃,30分鐘內(nèi),能夠吸收10mmol dNTP,形成酸性不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)活性單位。
酶儲(chǔ)存緩沖液B:50%甘油,20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5%Tween20和0.5%Nonidet P40。
配套試劑:
1.10×反應(yīng)緩沖液(不含MgCl2): Taq DNA Polymerase 10 X Reaction buffer (without Mg2+)包含 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的最適濃度為0.2毫摩爾。
2.25mM MgCl2:反應(yīng)中鎂離子在混合物中的最終濃度由使用者根據(jù)自己需要決定。建議使用濃度在1£-4毫摩爾。注:使用前完全溶解氯化鎂溶液并充分振蕩幾秒鐘。
3.10X反應(yīng)緩沖液(含MgCl2):包含 15mM MgCl2,500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的最適濃度為0.2毫摩爾。
注意:反復(fù)凍融可能會(huì)引起氯化鎂沉淀,將緩沖液在90℃加熱10分鐘能恢復(fù)溶液的均一性。
質(zhì)量控制:
1. 活性:大于5單位/微升。
2. Overdigest (OD) 檢測(cè): 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克λDNA在74℃下反應(yīng)16小時(shí)后,用瓊脂糖凝膠電泳未檢出降解的λDNA。
3. 切口酶檢測(cè): 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克超螺旋質(zhì)粒DNA在74℃下反應(yīng)4小時(shí)后,用瓊脂糖凝膠電泳未檢出切口酶或線性DNA帶。
4. 熱穩(wěn)定性檢測(cè): 94℃時(shí),每微升5單位Taq DNA 聚合酶在緩沖液中的半衰期長(zhǎng)于1小時(shí)。
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