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Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒

英文名稱:
分子式:
分子量:
別名:
產(chǎn)品訂購:
品名 規(guī)格 包裝 單價(jià) 貨期
Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒 1000微孔(100T) 462元 現(xiàn)貨
性狀:
產(chǎn)品組成:
Folin酚甲試劑A 100ml×2
Folin酚甲試劑B 5ml
Folin酚乙試劑(1N) 20ml
PBS稀釋液 30ml
BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(5mg/ml ) 1ml
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

    Folin-酚試劑法包括兩步反應(yīng):第一步是在堿性條件下,蛋白質(zhì)與銅作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物;第二步是此絡(luò)合物將Folin試劑還原,產(chǎn)生深藍(lán)色,顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。定量范圍為5~100μg/ml蛋白質(zhì)。Folin試劑顯色反應(yīng)由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質(zhì)因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強(qiáng)度稍有不同。

操作說明:

  1.根據(jù)需要量,取適量Folin酚甲試劑A和B按50:1混合,混合后有效期為24小時(shí),過期失效。

  2.根據(jù)需要量,取適量BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋稀釋10倍至濃度0.5mg/ml。

若采用酶標(biāo)儀法(96孔)

  3.將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板中,加PBS補(bǔ)足到20ul。

  4.將樣品作適當(dāng)稀釋(最好多做幾個(gè)梯度),加20ul到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)誤差比較大,所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。

  5.將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200ul,輕輕震動(dòng),混勻,室溫放置10分鐘。

  6.各孔加入20微升Folin酚乙試劑,迅速混勻,37℃放置30分鐘。用酶標(biāo)儀測(cè)定A650計(jì)算蛋白濃度。

若采用分光光度計(jì)法(接上述步驟2)

  3.取八支(或者更多)5ml離心管,標(biāo)號(hào),按下表加入試劑。

  4.混勻,37℃放置30分鐘。分光光度計(jì)測(cè)定A650計(jì)算蛋白濃度。

貯存:
BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存有效期至少3個(gè)月,-20℃保存有效期至少一年,其他試劑室溫保存有效期至少一年。試劑開封使用后請(qǐng)及時(shí)密閉保存,F(xiàn)olin酚乙試劑顏色變成深綠色即失效。
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