品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價(jià) | 貨期 |
Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒 | 1000微孔(100T) | 462元 | 現(xiàn)貨 |
Folin-酚試劑法包括兩步反應(yīng):第一步是在堿性條件下,蛋白質(zhì)與銅作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物;第二步是此絡(luò)合物將Folin試劑還原,產(chǎn)生深藍(lán)色,顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。定量范圍為5~100μg/ml蛋白質(zhì)。Folin試劑顯色反應(yīng)由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質(zhì)因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強(qiáng)度稍有不同。
操作說明:
1.根據(jù)需要量,取適量Folin酚甲試劑A和B按50:1混合,混合后有效期為24小時(shí),過期失效。
2.根據(jù)需要量,取適量BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋稀釋10倍至濃度0.5mg/ml。
若采用酶標(biāo)儀法(96孔)
3.將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板中,加PBS補(bǔ)足到20ul。
4.將樣品作適當(dāng)稀釋(最好多做幾個(gè)梯度),加20ul到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)誤差比較大,所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
5.將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200ul,輕輕震動(dòng),混勻,室溫放置10分鐘。
6.各孔加入20微升Folin酚乙試劑,迅速混勻,37℃放置30分鐘。用酶標(biāo)儀測(cè)定A650計(jì)算蛋白濃度。
若采用分光光度計(jì)法(接上述步驟2)
3.取八支(或者更多)5ml離心管,標(biāo)號(hào),按下表加入試劑。
4.混勻,37℃放置30分鐘。分光光度計(jì)測(cè)定A650計(jì)算蛋白濃度。
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