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Name Specifications Packing Price Delivery
50T RMB 1155 現(xiàn)貨
100T RMB 1687.4 現(xiàn)貨
Character:
試劑盒組成 50 100 保存
有效期
裂解液 50ml 100ml 2-8℃ 一年
漂洗液 15ml 30ml RT 一年
洗柱液 50ml 100ml RT 一年
RNase free ddH2O 15ml 30ml RT 一年
RNase free吸附柱 50個 100個 RT 一年
RNase free收集管(2ml) 50個 100個 RT 一年
Quality Standard:
操作步驟:
1. 樣品處理:
 a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml 裂解液中混勻。
 b. 動物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織加1ml 裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
 c. 貼壁細胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細胞,每106細胞加1ml  裂解液。用取樣器吹打混勻。
 d. 細胞懸液:離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml 裂解液混勻。
 e. 血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3 倍體積紅細胞裂解液,混勻后室溫放置10 分鐘,10000rpm離心1 分鐘。棄上清,若沉淀含有紅細胞,可加入2 倍體積紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml 裂解液混勻。
2. 將處理后的樣品在室溫放置5 分鐘,使得核酸蛋白復合物完全分離。
3. 向勻漿樣品中加0.2ml氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置3-5分鐘。
4. 2-8℃ 12000 rpm 離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中,把水相轉移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul  洗柱液,室溫放置2分鐘,2-8  12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
6. 第4 步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻,加入吸附柱靜置2 分鐘,2-8  12000rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),2-8  12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8  12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
9. 12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。
10.  將吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O ,室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即得到RNA

注意事項:
1 ,所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品,操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。
2 ,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9 之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。

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