Taq DNA Polymerase是從克隆有Thermus aquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)后分離純化的，其分子量為94 KD。該酶具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’核酸外切酶活性，無3’-5’外切酶活性。在PCR反應(yīng)中，Taq DNA Polymerase延伸速度為1-2 kb/分鐘，產(chǎn)物3’端帶A，可直接用于T/A載體克隆。該酶無外源核酸酶和細(xì)菌基因組DNA的污染，穩(wěn)定性好，特異性強(qiáng)。

活性定義：

    1單位(U) Taq DNA Polymerase活力定義為在74℃，30分鐘內(nèi)，以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板，將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。

質(zhì)量控制：

    SDS-PAGE檢測Taq DNA Polymerase純度大于99%；經(jīng)檢測無外源核酸酶活性；PCR方法檢測無宿主殘余DNA；能有效地?cái)U(kuò)增人類基因組中的單拷貝基因；室溫存放一周，無明顯活性改變。

酶貯存緩沖液：

    20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol; 穩(wěn)定劑

適用范圍：

    用于小于6kb的對(duì)保真度要求不高的DNA片段的PCR擴(kuò)增、DNA標(biāo)記、引物延伸、序列測定、平末端加A等，產(chǎn)物可以直接用于T/A載體克隆。

注意事項(xiàng)：

1、PCR反應(yīng)體系加樣時(shí)，最后一步加入Taq DNA Ploymerase，整個(gè)過程宜在冰上操作。

2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反應(yīng)時(shí)，請(qǐng)用高壓滅菌處理過的吸頭。

3、10×Taq Buffer分為含15 mM Mg2+和不含Mg2+兩種，不含Mg2+的Buffer，另外配有25 mM MgCl2。如果沒有特別指定，通常提供的為含有15 mM Mg2+的Buffer。